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伊文斯藍/埃文斯藍溶液,0.5%
  • 產(chǎn)品貨號:
    BN20368
  • 中文名稱:
    伊文斯藍/埃文斯藍溶液,0.5%
  • 品牌:
    Biorigin
  • 貨號

    產(chǎn)品規(guī)格

    售價

    備注

  • BN20368-100mL

    100mL

    ¥180.00

產(chǎn)品描述

產(chǎn)品說明:

     伊文斯藍(Evans Blue)又稱偶氮藍。伊文斯藍與臺盼藍都是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的 完整性和細胞是否存活?;罴毎蛴型馀殴δ芏鵁o法被伊文斯藍染成藍色,而死細胞會被染成淡藍 色。因此可以通過此方法在顯微鏡下區(qū)分死細胞與活細胞,但無法區(qū)分死亡與壞死。

操作說明:(僅供參考)

(一)血腦屏障通透性

1、取處理后的實驗動物(以小鼠為例),靜脈注射 Evans Blue Stain (0.5%),小鼠眼睛、皮膚出現(xiàn)藍色。0.5~1h 后處死小鼠,取目的腦組織。 

2、腦組織置于 1.5ml 離心管中,加入 1ml PBS, 迅速用組織勻漿器將腦組織制成勻漿, 離心。 

3、取上清,加入等量三氯乙酸,4℃孵育。該步驟亦可采用如下操作: 取上清,按上清:丙酮=3:7 比例加入丙酮,室溫孵育 24h。 

4、離心 15min。

5、取上述溶液,用分光光度計測 620 nm 處吸光值(OD 值)。同時測定已知不同梯度的標準依文思藍的 OD 值,繪制標準曲線。根據(jù)標準曲線計算出待測樣品的伊文斯蘭含量。

(二)活細胞染色 

1、取 100μl 重懸細胞到常規(guī)離心管內(nèi),入 100μl Evans Blue Stain 輕輕混勻染色(染色時間可適當延長,但不宜超過10min)。

2、吸取少量經(jīng)過染色后的細胞,用血細胞計數(shù)板計數(shù)。通常如果要比較精確地進行定量,每個細胞樣品至少數(shù) 500 個細胞,數(shù)出藍色細胞和細胞總數(shù)。細胞存活率計算公式如下:細胞存活率=(細胞總數(shù)-藍色細胞數(shù))/細胞總數(shù)×100%

注意事項: 

1、Evans Blue Stain 對人體有輕微毒性,請小心防護。 

2、細胞染色時,注意凋亡小體偶爾也有拒染現(xiàn)象。 

3、血腦屏障通透性實驗中,Evans Blue Stain 注射量應根據(jù)不同動物以及動物的重量調(diào)整。 

4、最好采用低溫冷凍離心機進行離心。 

5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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